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倉(cāng)鼠Elisa試劑盒樣品收集、處理及保存方法

更新時(shí)間:2019-08-27      瀏覽次數(shù):1925
   倉(cāng)鼠Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)原理:
  倉(cāng)鼠Elisa試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中倉(cāng)鼠瘦素(LEP)。用純化的倉(cāng)鼠瘦素(LEP)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加倉(cāng)鼠瘦素(LEP),再與 HRP 標(biāo)記的倉(cāng)鼠瘦素(LEP)抗體結(jié)合,形成抗體抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物 TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的倉(cāng)鼠瘦素(LEP)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中倉(cāng)鼠瘦素(LEP)濃度。
  倉(cāng)鼠Elisa試劑盒安全性:
  1)避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。
  2)實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
  3)不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
  倉(cāng)鼠Elisa試劑盒的組成:
  倉(cāng)鼠Elisa試劑盒樣品收集、處理及保存方法:
  1)血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,10×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
  2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
  3)細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
  4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
  5)保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能
  不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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